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临床微生物检验,在感染性疾病及相关病患的诊断治疗预防及研究工作中起者越来越重要的作用,为保障检验结果的准确性和可靠性,日常工作中要注意开展质量控制,包括室间质量控制和室内质量控制。
室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式,也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段。参加由各省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控,会遇见一些平时罕见或未见过的菌株,通过质控检验对它们的生长条件、菌落 形态、染色、镜下形态等有了较深的感性认识。日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检。
室内质控建立在一个较好的室内质控的基础上的,做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。 室内质控主要包括几个方面:实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、染色液及染色方法质量控制、常用仪器的质量控制、药敏实验的质量控制、及发报告前的质量控制。
要想获得可靠的检验结果,首先要取得一份合格的标本,所以实验室前的质量控制是保障检验结果准确性的关键。包括标本采集时间(时机)、采集方法与运送等。采集时间一般应在发病早期,应用抗生素前或下次用药前(血药浓度相对较低)。呼吸道标 的采集要尽量减少上呼吸道正常菌群干扰,如采集晨痰、随意痰要用清水漱口 2~3 次后深呼吸用力咳出 气管内痰块直接吐于无菌器皿内,迅速盖上器皿盖送检。注意收集浓痰或粘稠液而非唾液。咽拭子、湿润无菌生理盐水、湿润无菌拭子,越过舌根到达咽后壁或悬雍垂后侧或咽喉部发红、灰白色可疑假膜部位,反复涂抹数次后小心退出,随即置于无菌试管内塞紧塞子送检。拭子退出时注意避免接触口腔黏膜、舌头等部位。泌尿道标本的采集要尽量避免或减少尿道口正常菌群干扰。采集中段尿,无论男性、女性、儿童病人均应先冲洗尿道口,弃去开始排出的尿液,留取中段尿 4~6 毫升于无菌试管内塞紧塞子,尽快送检。尿量不宜太多,试管塞子与尿液不应直接接触。留取导尿管尿要排空导尿管内陈旧尿液,接取新引出尿液 4~6 毫升。倘留置尿管超过三天,尿管内难免有细菌滋生,应避免采用。血液标本的采集要严格采血部位的皮肤消毒及选择恰当采血时机,最新一期华检验医学杂志(2004 年第 2 期)有详细介绍。粪便标本的采集要挑取含脓、黏液、血等病理改变或水样粪便送检。直肠拭子采样量要足够,拭子上肉眼应可见粪便。脓液标本要尽量避免病灶表面细菌污染。开放性脓肿,采样前无菌盐水冲洗伤口,拭去表面污染脓液,挑取病灶深部脓液;封闭性脓液,严格病灶皮肤或黏膜表面的消毒后无菌干燥注射器穿刺抽取,置无菌试管内送检,或切开排脓时无菌拭子采集深部脓液。当创面出血、或受伤 12 小时、换 药 2 小时内等情况不宜采集标本。为了采集到各种比 较合格的临床标本,实验室人员平时须与临床医生、护士、多些沟通;与护理部联系进行有关讲座,让护士们清楚各种标本如何留取;或制作一些正确留取标本的指南、便条、打印好,分发给临床。
各种临床标本送到实验室后,大致检查其是否合格很有必要。这就是标本接种前质量控制。对呼吸道标本要了解其受正常口腔菌污染或影响程度。具体做法一是记录标本外观:分为脓痰(P)、粘液(M)、 血(B)、唾液(S)、水样(W)五个级别,以 P、M、 B 级别适合细菌培养;二是涂片镜检:无菌拭子挑取少量痰块于洁净玻片,直接镜检或革兰染色后镜检。低倍镜记录白细胞、上皮细胞数量,倘白细胞>25 个、上皮细胞<10 个,或白细胞>>上皮细胞数, 视为合格的标本;油镜检查有否革兰氏阳性、阴性细菌及数量多寡,倘有特征性表现,可先电话报告临床。对泌尿道标本要了解尿液中各种细胞数,初步判断有 否尿路感染。具体做法取尿沉渣直接镜检,低倍镜,平均 5 视野,记录白细胞、红细胞、上皮细胞及管型等数量,记录于检验单背后,对血液细菌培养标本,要记录采血量是否足够,即血量与增菌液量之比是否达到 1:5-10。对粪便标本肉眼检查是否有脓液、血 液、黏液等病理改变的粪便或肛拭子上有否足够的标本。
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