目前我国医院的药敏试验都是依照美国临床和实验室标准协会（CLSI）所颁发的操作方法和判断标准。要保证药敏实验结果可靠，一定要在每天的操作中严格执行 CLSI的要求，如新购 M-H 琼脂要用粪肠球菌 ATCC29212 复方新诺明纸片质控合格后使用；M-H 琼脂的配置除了 PH7.2～7.4；强调平板厚度 4mm，用量筒分装，9 cm平板倾入23～25ml，一般 7 日内用完，8℃储藏，用前孵箱预温至琼脂表面无水滴；药敏纸片要选购标准含量、质量稳定的产品，比如：OXOID、Liofilchem等品牌的药敏纸片， 特殊药敏纸片储藏于-20℃以下，常规纸片储藏于 2-8℃保存，用前置室温 1h 后方启用；菌液须调至适宜浊度；标准比浊管储藏室温、 暗处。半年更换；把菌液涂布于 M-H 平板时棉拭子上多余菌液要在试管壁挤出，划线涂布 M-H 平板， 旋转平板 60 度，重复涂布三次，最后拭子在平板边缘涂布一圈；5～10 分钟后贴药敏纸片，无菌镊子轻压纸片使完全与平板表面接触，9cm平板贴 6～7 张试纸，两纸片中心距离≥24mm，纸片一旦贴上就不能改变位置，10～15 分钟后倒置 35℃普通孵箱培养 16～24 小时；读抑菌圈要用尺子量，以没有明显肉 眼可见生长物区域为抑菌圈，一般极细小菌落生长可忽略不计，变形杆菌抑菌圈内迁移生长的薄层菌苔、复方新诺明抑菌圈内轻微生长小于20%也可忽略不计。对药敏菌株的选择也有明确要求，药敏实验的菌株都应选自原始的琼脂平板，不同菌种的不能在同一药敏平板上进行实验。避免用临床标本直接去做药试，若接做了，必须按标准方法重做第二次。此外，每周用金葡、大肠及铜绿三株标准菌株测试相应药敏纸片，看其抑菌圈是否在 CLSI 规定范围，检查日常药试结果是否可靠的周质控是必不可少的工作。倘有超出规定范围，马上得寻找原因纠正，或恢复每日的标准菌株质控，这时工作量很大但也无别的选择。

   最后，打出细菌鉴定与药敏报告填写验单前需做质控，主要指两方面：一是肉眼大致对照原始平板上被鉴定的细菌菌落形态与仪器或手工编码鉴定出来的菌种是否相吻合。比如鲍曼不动杆菌由于其氧化酶阴性，常被安排上 ID32 鉴定条进行鉴定，又由于其生化反应不活泼，常被细菌鉴定仪鉴定为铜绿假单胞菌，这时就要复查氧化酶实验和对照原始板看看菌落形态到底相似鲍曼还是铜绿，核实后再填写菌种。此外，对于呼吸道之类与外界相通的标本如被鉴定菌是条件致病菌，也须再于原始平板上最后检视到底是否为优势菌，是否真的需要或值得鉴定与报告，以免误导临床用药。因为当初作鉴定的决定时可能会因各种细菌的长势未充分表达而把握不准确，需要在发报告前作最后的审核。二是检查药敏结果与菌种是否吻合。即分析药敏结果与鉴定出来的菌种是否一致，有无矛盾。一般来说各种细菌对抗生素的敏感性有一些比较固定的药敏谱，每间医院的分离菌又有一些特定的表现。比如阴沟肠杆菌对头胞西丁多半耐药、肺炎克雷伯菌对氨卞青霉素天然耐药、洋葱伯克霍尔得菌对复方新诺明、氧哌嗪青霉素、氧哌嗪青霉素/他唑巴坦等纸片的抑菌圈多半很大，对丁胺卡那、庆大霉素则多半耐药，又比如本院的大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率比本地医院的高些，等等。倘若发现药敏谱与菌种的普遍表现有异常时，就得分析这异常到底是来自于药敏实验差错或鉴定差错，还是源自于这株菌自身产生的变异或特殊表现。这时就得把原始板与药敏板一起对照比较，确定问题到底出自那一环节，弄清楚了再填写验单发报告。在配置有先进细菌鉴定仪的实验室可以通过仪器内设专家系统得到有关鉴定菌与药敏结果的分析与提醒，这是不小的帮助，但原始板的检查只能靠自己。没有先进药敏仪的医院这最后的把关就更重要，更要靠长年累月的工作经验和高度的责任心。最后的质控是前面所有质控效果的总体表现，也是质控的最终目的：临床微生物实验室发出的检验报告准确、可靠，对临床医生就有较高的诊断、治疗参考价值。