碳青霉烯类抗生素常用于治疗多重耐药肠杆菌科感染，其耐药性增加的机制是肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶[KPC, Klebsiella pneumoniae carbapenemase].KPC ß-内酰胺酶最常见于肺炎克雷伯菌，但在其他种类的肠杆菌科[克雷伯氏催产杆菌、肠杆菌属、大肠杆菌属、沙门氏菌属、弗氏柠檬酸杆菌属和沙雷氏菌属]和铜绿假单胞菌中也有少许报告。

        KPC酶对包括青霉素、头孢菌素、单胺菌素和大多数β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂在内的所有β-内酰胺类药物具有耐药性.KPC水解碳青霉烯类药物[厄他培南、亚胺培南和美罗培南]降低其活性，对临床患者护理和公共健康构成巨大威胁。

        对产KPC的临床分离株进行实验室鉴定，对于限制具有这种耐药机制的菌株的传播至关重要。试验评估了一种新的检测KPC潜在方法：先用CRE显色培养基进行筛选，然后用MTS药敏试纸[MTS,MIC test Strip]MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美罗培南/美罗培南+硼酸进行确认。

        细菌分离株：通过分子诊断方法确定的91株具有已知耐药机制的细菌分离株[获得性ampC,MBL,KPC和产ESBL的肠杆菌科].将所有研究的分离物在-20°C冷冻,并在Mueller Hinton Agar平板上连续培养两天,以确保培养物的纯度。

耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌[CRE]显色培养基

        利飞驰系列CRE显色培养基，用来检测耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌。所有平板在36 +/- 1°C需氧条件下孵育，在18-24小时后读取结果数，并根据说明书进行结果解释。

肺炎克雷伯菌KPC阳性

MTS药敏试纸     

        MTS厄他培南/厄他培南+硼酸是由厄他培南[0.125-8 mg/L]和厄他培南[0.032-2 mg/L]加固定浓度硼酸的双边梯度定量试纸。MTS美罗培南/美罗培南+硼酸是由美罗培南[0.125-8mg/L]和美罗培南[0.032-2 mg/L]加上固定浓度的硼酸的双边梯度定量试纸。

       所有试纸条均接种在MH琼脂平板上，孵育24小时后进行结果解释。所有菌株均在CRE显色培养基上，并在MH琼脂平板上用MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美罗培南/美罗培南+硼酸进行敏感性和特异性检测。

MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美罗培南/美罗培南+硼酸

        产KPC的肺炎克雷伯菌在CRE上不受抑制地生长，并产生绿色或蓝色菌落[100％敏感性]。对于不产KPC的肠杆菌科细菌，生长不良/无生长/非典型菌落颜色很明显[特异性为77％]。

        用KPC阳性和阴性菌株评估MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美罗培南/美罗培南+硼酸。两种测试均显示对MTS厄他培南/厄他培南+硼酸的敏感性分别为100％和89.3％，对MTS美罗培南/美罗培南的特异性分别为95.6％。

        研究表明，CRE显色培养基作为KPC产生菌的筛选步骤是有效的，MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美罗培南/美罗培南+硼酸作为其后续验证步骤；这种结合可以快速检测对碳青霉烯类抗生素耐药的微生物，并立即实施感染控制措施，避免碳青霉烯类抗生素耐药的蔓延。