KB012A 李斯特菌鉴定试剂盒

KB012A HiListeria™ Identification Kit

李斯特菌鉴定试剂盒

 

货号	品名	规格
KB012A	李斯特菌鉴定试剂盒 HiListeria™ Identification Kit	5KT、10KT、20KT

概况

该试剂盒为标准化的显色检测系统，通过李斯特菌特异性的动力学、糖发酵和生化反应进行鉴定。微生物的发酵反应，引起培养基颜色发生变化。 

 

使用说明

1、待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可在PALCAM琼脂（货号:M1064）或胰蛋白䏡琼脂（货号：M538）（含血或不含血）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤（货号：M210）中，在35-37℃培养4-6小时，直到在620nm处，接种液浊度≥1.0OD。

2、无菌打开试剂盒，撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35℃-37℃孵育24-48小时。

 

结果判定

依据结果诠释表。在第2孔、第4孔和第5孔，在24-48小时孵育期结束后，分别添加如下试剂：

1）触酶试验：第1孔

     用接种环刮取第1孔内表面，将接种环蘸到含3%H₂O2的干净小试管中。

     接种环表面冒泡为阳性。接种环表面没有冒泡为阴性。

     注意：3%的H₂O2需新鲜配置。

2）硝酸盐还原试验：第2孔

     加1-2滴对氨基苯磺酸（货号：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（货号：R009）

     立即出现粉红色为阳性。颜色无变化为阴性。

3）七叶苷水解试验：第3孔

     第3孔变为黑色，为阳性反应。

4）伏-普试验：第4孔

    加3-4滴Barritt试剂A(货号：R029)和1-2滴Barritt试剂B（货号：R030）

    10分钟内出现粉红色为阳性。无颜色变化或有轻微变化为阴性。

5）甲基红试验：第5孔

     加1-2滴甲基红试剂（货号：I007）

     试剂保持红色为阳性。试剂脱色变黄为阴性

6）糖发酵试验：第6孔-第12孔

     酸产生导致培养基颜色由红变黄，为阳性反应。。如果仍保持红色，则为阴性。

 

12种生化反应

1	触酶试验
2	硝酸盐还原试验
3	七叶苷水解试验
4	伏普试验
5	甲基红试验
6	木糖发酵试验
7	乳糖发酵试验
8	葡萄糖发酵试验
9	α-甲基-D-甘露糖苷
10	鼠李糖发酵试验
11	蔗糖发酵试验
12	甘露醇发酵试验

 

鉴定的李斯特菌物种

格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）

单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes）

英诺克李斯特菌（Listeria innocua）

斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）

伊氏李斯特氏菌伊氏亚种（Listeriaivannovii Sub sp. ivannovii）

伊氏李斯特菌伦敦亚种（Listeriaivannovii Sub sp. londoniesis）

威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）

 

储存条件及保质期

2℃-8℃；12个月