印度HiMedia 维生素B12测定用培养基

货品名称：维生素B12测定用培养基 英文名：Vitamin B12 Assay Medium   货号：M036   品牌：印度HiMedia   用途：维生素B12的微生物法测定

原理

乳酸杆菌生长需要特别的营养，因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基：即维持培养基，用于保持菌种活力；接种培养基，用于测试菌液的制备；测定用培养基，用于待测维生素的定量。

维生素B₁₂测定用培养基，不含维生素B₁₂，但包含所有其他维生素和必要养分，用于莱士曼乳酸杆菌（ATCC 7830）的生长。莱士曼乳酸杆菌（ATCC7830）作为测定用菌，最早由Capp等人描述（1）并被美国药典和美国分析化学家协会（AOAC）所推荐（2，3）。

应用

维生素B₁₂测定用培养基推荐采用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830）作为测定用菌，进行维生素B₁₂的微生物法测定。

配置

称取8.45g干粉培养基溶于100ml蒸馏水，必要时加热使培养基完全溶解。混匀，使轻微的沉淀均匀分布。测定时，分装试管，每管为5ml培养基（包含标准品和待测样品）。加蒸馏水，使总体积达到10ml。高压消毒15磅121°C 5分钟。立即冷却培养基。每个试管(10 ml)的维生素B12水平为0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng时，均可获得满意结果。

培养反应

进行微生物法测定维生素B₁₂。采用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC7830），35-37°C孵育18-24小时。

生长状况

随着测定管标准品水平升高，（美国药典维生素B12标准水平，0，0.025，0.050，0.075，0.1，0.125，0.150，0.2ng)，目标菌生长逐渐递增，伴随着620nm处吸光度的增加。 

参考文献

1.  Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H.,1949, J. Biol. Chem., 178:517.

2. The UnitedStates Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States PharmacopeialConvention, Rockville, MD.

3.  H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysisof the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC,Washington,D.C